ELISA - Enzýmový Imunosorbentový Test: Prepis

Obsah:

ELISA - Enzýmový Imunosorbentový Test: Prepis
ELISA - Enzýmový Imunosorbentový Test: Prepis

Video: ELISA - Enzýmový Imunosorbentový Test: Prepis

Video: ELISA - Enzýmový Imunosorbentový Test: Prepis
Video: 💜 СТРИМ ПО РОБЛОКСУ С ПОЛЕЙ И САШЕЙ В ЧЕСТЬ 10К 💜 2024, Marec
Anonim

Diagnostická metóda (ELISA) je informatívna a nie príliš nákladná, preto mnoho laboratórií ponúka svojim klientom túto metódu (enzýmovo-imunoanalýzový test). Štúdia sa uskutočňuje na lačný žalúdok, krv na analýzu sa odoberá z kubitálnej žily pacienta. Pred testom ELISA sa odporúča nefajčiť ani nepiť alkohol.

Obsah článku:

  • 1 Čo je krvný test ELISA
  • 2 Čo sú to imunoglobulíny
  • 3 Ako sa vykonáva krvná ELISA
  • 4 Imunoanalýza proti parazitom pomocou ELISA
  • 5 Ako sa používa test ELISA
  • 6 Testy na imunologickú analýzu krvi pomocou ELISA
  • 7 Rozsah imunologickej analýzy krvi pomocou ELISA
  • 8 Indikácie pre použitie a zistené choroby pomocou ELISA
  • 9 Výhody metódy ELISA
  • 10 Nevýhody metódy ELISA
  • 11 Možné výsledky testu ELISA

Čo je krvný test ELISA

Spomedzi metód analýzy krvi, ktoré umožňujú vyhodnotiť schopnosť tela odolávať infekčným chorobám a ukázať fázu ochorenia, zaujíma dôležitú úlohu imunosorbentová skúška spojená s enzýmami (ELISA). Uskutočnenie tejto štúdie vám umožňuje komplexne vyhodnotiť aktivitu ochrannej funkcie krvi a identifikovať stav imunodeficiencie pri infekčných patológiách, ako aj krvných chorôb, autoimunitných procesov, hormonálnych problémov.

Toto je laboratórna štúdia, ktorá vám umožňuje určiť prítomnosť špecifických protilátok (ochranné faktory krvi proteínovej povahy) na určité antigény (patogénne látky). Z protilátok majú prvoradý význam imunoglobulíny, ktoré môžu existovať vo forme imunokomplexov.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Imunoglobulíny sa produkujú ako výsledok komplexných neurohumorálnych reakcií ľudskej imunity, ktoré vznikajú ako reakcia na zavedenie cudzích antigénov. Pre každý typ patogénneho činidla sa vyrábajú jeho vlastné špecifické protilátky. Pôsobia tak, že „viažu“antigén alebo patologický mikroorganizmus a vytvárajú komplexnú zlúčeninu „antigén-protilátka“s následnou neutralizáciou, enzymatickou lýzou, fagocytózovými reakciami a odobratím z tela. Metódou ELISA sa určuje prítomnosť patogénov alebo škodlivých látok prítomných u pacienta pomocou prítomnosti určitých komplexov.

Z dôvodu nízkej ceny a použitia krvi ako biomateriálu sa táto metóda používa ako metóda skríningu. Napríklad, ak existuje podozrenie na parazitózu, pacienti darujú krv na stanovenie protilátok na škrkavky, lamblie atď. Ak je výsledok pozitívny, nemali by ste okamžite začať s liečením parazitov - musíte porovnať klinický obraz, výsledky testu ELISA a prípadne aj výsledky iných vyšetrovacích metód.

Je potrebné si uvedomiť, že po ukončení liečby môžu protilátky zostať v našom tele veľmi dlho, dokonca aj potom, čo infekcia opustila naše telo, t.j. takzvaná „sérologická jazva“zostáva. Napríklad na nočnej oblohe sú napríklad tisíce hviezd. Mnoho z týchto hviezd už dávno zomrelo, ale ich svetlo žiarilo dodnes, po stáročia. V skutočnosti vidíme iba hviezdnu stopu. Svetlo je, ale hviezda je už dávno preč.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Ale ak nie je žiadne svetlo, neznamená to, že tam hviezda nebola. To isté platí pre protilátky. Ich prítomnosť nezaručuje prítomnosť požadovaného infekčného agens v tele. Neprítomnosť protilátok neznamená, že neexistuje žiadna infekcia. Ak je výsledok analýzy pomocou ELISA pozitívny, znamená to, že musíte hľadať infekciu konkrétnejšími a nákladnejšími metódami - PCR, bakteriologické kultúry. Falošne pozitívny výsledok je možný, ak niekoľko mikróbov má podobnú antigénnu štruktúru, potom sa „rôzne“protilátky vytvoria pre rôzne mikróby.

Čo sú to imunoglobulíny

Bolo objavených a študovaných 5 hlavných tried imunoglobulínov - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. úloha ostatných ešte nebola úplne objasnená a nachádza sa vo fáze vedeckého výskumu.

Hlavnou úlohou imunoglobulínu A (IgA) sú ochranné funkcie slizníc dýchacích ciest, gastrointestinálneho traktu a močových ciest. Pri akútnom nástupe choroby nie je možné ich identifikovať. Tieto ochranné komplexy sa objavujú až po 2 týždňoch od začiatku ochorenia, niekedy neskôr. Väčšina imunoglobulínu A sa koncentruje v slizničných tkanivách. Približne 80%. Zvyšok protilátok cirkuluje v krvi.

Hlavnou funkciou je neutralizácia a zničenie mikroorganizmov. Po odznení akútnych prejavov ochorenia sa množstvo týchto imunoglobulínov začne znižovať a úplne vymizne až do 8 týždňov od začiatku ochorenia. Ak sa IgA zistí neskôr, znamená to chronizáciu procesu.

Hlavnými a prvými markermi akútnej fázy vyvíjajúcej sa patológie sú imunoglobulíny triedy M (IgM). Nachádzajú sa do 5. dňa od začiatku nevoľnosti. Ich prítomnosť v krvi môže byť stanovená po dobu asi 6 týždňov. Potom začnú rýchlo miznúť.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Zvyšková imunitná reakcia je charakterizovaná prítomnosťou imunoglobulínov triedy G (IgG) v krvi. Výskyt týchto faktorov v krvi sa zisťuje asi mesiac po nástupe choroby. V budúcnosti ich možno určiť na mnoho mesiacov, rokov a dokonca na celý život, pričom vykonávajú ochrannú funkciu proti návratu (recidíve) choroby av niektorých prípadoch znemožňujú sekundárny vývoj patológie.

Ak sa množstvo imunoglobulínu G začne opäť zvyšovať, je možné predpokladať opätovnú infekciu. Podobný záver možno urobiť vykonaním dvoch alebo troch testov vykonaných v intervale 2 týždňov.

Pri parazitológii sa používa imunoglobulín E (IgE), ktorý sa nachádza na B-lymfocytoch a nachádza sa v nízkych koncentráciách u zdravých ľudí. Po 10 rokoch života dosiahne svoje maximálne hodnoty. Množstvo imunoglobulínu D sa zvyšuje počas tehotenstva u pacientov so systémovými ochoreniami spojivového tkaniva, bronchiálnou astmou a ochoreniami spôsobenými stavom imunodeficiencie.

Ako sa vykonáva krvná ELISA?

Na enzýmové imunoanalýzy sa vo väčšine prípadov používa krv pacientov, niekedy sa odoberá tkanivo sklovca, tekutina miechového kanála a plodová voda.

Krv sa odoberá injekčnou ihlou do injekčnej striekačky z kubitálnej žily. Štúdia sa uskutočňuje na lačný žalúdok. Je potrebné si uvedomiť, že užívanie niektorých liekov môže ovplyvniť výsledok testu. Pred darovaním krvi sa musíte vyhnúť fajčeniu, pitiu alkoholu. Príjem omamných látok môže výsledky skresliť.

V prípade negatívnych hodnôt imunoglobulínov IgM, IgG, IgA môžeme hovoriť o neprítomnosti ochorenia alebo jeho počiatočnej fáze a výsledok s mínusmi je možný s úplným zotavením po značnom čase.

Ak sa IgA a IgM nezistia a IgG sa prejaví pozitívne, potom s najväčšou pravdepodobnosťou hovoríme o vytvorenej imunite po infekčnom ochorení alebo po očkovaní.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Ak sa IgA a IgM nezistia a IgG sa prejaví pozitívne, potom s najväčšou pravdepodobnosťou hovoríme o vytvorenej imunite po infekčnom ochorení alebo po očkovaní.

V prípade vysokého titra IgM s negatívnymi hodnotami IgG, IgA je možné dospieť k záveru, že existuje akútne infekčné ochorenie.

Súčasné pozitívne hodnoty výsledkov imunoglobulínov - IgA, IgM, IgG sú charakteristické pre akútnu fázu recidívy existujúceho chronického ochorenia.

Pokiaľ ide o chronickú infekciu vo fáze retencie procesu (remisia), ELISA vykazuje negatívne hodnoty imunoglobulínu M (IgM), zatiaľ čo výsledok imunoglobulínov G (IgG) a A (IgA) bude pozitívny.

Imunoanalýza na parazity pomocou ELISA

ELISA je skratka pre enzýmovo viazaný imunosorbčný test na parazity. Znamená to lekárske testovanie imunitného systému osoby. Test je založený na schopnosti protilátok meniť farbu. Táto diagnostická metóda má veľa pozitívnych vlastností. Napríklad je schopný odhaliť obrovské množstvo chorôb spôsobených infekciou. Je najúčinnejšia v prípade chorôb spôsobených parazitickými organizmami.

Čo prezentovaná technológia poskytuje: stanovenie prítomnosti hlíst v krvi; hľadanie ďalších patogénov v tele; môžete zistiť dôvody zhoršenia vášho zdravia; ošetrenie je tiež založené na analýzach získaných týmto spôsobom; môžete monitorovať zdravie imunitného systému.

Ďalšou dobrou vlastnosťou je schopnosť sledovať markery rakoviny bez ohľadu na ich pôvod, ale samozrejme podliehajú ich prítomnosti v tele. Tento test je vhodný aj na opis stavu ľudského reprodukčného systému. Prítomnosť určitých proteínov, hormónov a peptidov umožňuje posúdiť potenciál partnera z hľadiska počatia dieťaťa, ako aj odhadovanú kvalitu budúceho plodu.

Krvný test na Giardii je u moderných lekárov pomerne populárnou praxou. Okrem toho je táto výskumná metóda vynikajúcim nástrojom pre biomedicínsku analýzu a kvantitatívnu štatistiku, pokiaľ ide o špecifické antigény.

Ako sa používa metóda ELISA?

Bolo by veľkou chybou zamieňať metódu ELISA s metódou sondovania a následného skúmania výkalov. Tieto sa uskutočňujú pomocou metód na mikroskopickej úrovni, keď sa odoberie vzorka stolice od pacienta alebo sa odoberie od potenciálneho pacienta priamo v zdravotníckom zariadení. Vo vzorke sa snažia zistiť hlístové invázie a ďalšie komponenty, tak či onak spojené s životne dôležitou aktivitou parazitov. Študujú sa nielen mikroskopické parazitárne organizmy, ale aj ich zvyšky, ich vajíčka a larvy.

Interpretácia testu ELISA vám nemusí poskytnúť úplné pochopenie problému, preto je najlepšie poradiť sa s lekárom alebo laboratórnym asistentom. Je tiež chybou sa domnievať, že táto metóda je relevantná iba vtedy, ak sa v čreve parazitujú hlísty. Diagnostikuje sa aj mnoho ďalších orgánov - parazity môžu žiť v dvanástniku, žlčových cestách, pečeni a dokonca aj v pankrease.

Je pravda, že ide o zložitejšie prípady, takže kvalita takejto analýzy bude vo veľkej miere závisieť od pracovníkov laboratória, ktorí vykonávajú testovanie. Funkcie technológie a jej rozdiel od starého laboratórneho výskumu:

  • teraz sa namiesto vzorky stolice používa krv na stanovenie prítomnosti hlíst;
  • štúdia vzorky sa vykonáva v laboratóriu veľmi rýchlo, nasledujúci deň môžete získať úplné informácie;
  • náklady na laboratórny výskum sú lacné, pretože teológia je veľmi jednoduchá;
  • krvný test na hlísty poskytuje vysokú mieru presnosti.

Relevantnosť a hodnovernosť výsledkov testov je priamo úmerná kvalifikácii zdravotníckeho personálu, technickému vybaveniu laboratória, ako aj neexistencii nedbanlivosti alebo nepozornosti lekárov. Avšak aj najpozornejší a zodpovedný laboratórny asistent bude mať obrovské ťažkosti, ak je parazit v tele prítomný v jeho minimálnej populácii alebo ak bola spojka vykonaná okamžite v čase testovania.

Imunologická analýza krvi pomocou ELISA

Málokto vie o tom, aké krvné testy sú z hľadiska ľudského imunologického systému, pretože tieto testy nie sú také bežné. Takýto krvný test spravidla poskytuje informácie o víruse imunodeficiencie v ľudskom tele a je anonymný, pretože sa vykonáva na žiadosť pacienta.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

V podstate pre analýzu ELISA je skúmaným biologickým materiálom krv, môže sa však vyšetriť mozgomiešna tekutina, obsah sklovca, plodová voda, atď.

Na odber vzoriek sa používa krv odobratá zo žily na lačný žalúdok, z ktorého sa sérum získava na výskum odstredením. Štúdia krvného séra môže okrem toho odhaliť množstvo sexuálne prenosných chorôb (syfilis, herpes, chlamydia), ako aj všetky typy hepatitídy, osýpok, rubeoly, príušníc a toxoplazmózy.

V podstate pre analýzu ELISA je skúmaným biologickým materiálom krv, môže sa však vyšetriť mozgomiešna tekutina, obsah sklovca, plodová voda, atď.

Imunoglobulíny sú imunitné molekuly, ktoré sa môžu v tele viazať a neutralizovať na väčšinu infekčných patogénov a toxínov. V tomto prípade je najdôležitejšou charakteristikou imunoglobulínov ich špecificita, to znamená schopnosť viazať sa na špecifický antigén. Táto vlastnosť sa používa na vykonanie krvného testu na imunoglobulín.

Existuje päť typov imunoglobulínov, ale najviac študované sú imunoglobulíny A, M a G. Imunoglobulíny M a G sú aktívne v krvi. Imunoglobulíny A sú istou bariérou na povrchu slizníc, pretože sú prítomné vo veľkých množstvách.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Imunologický krvný test vám umožňuje určiť typ imunoglobulínov. Vďaka tomu umožňuje ELISA nielen diagnostikovanie choroby, ale aj určenie jej štádia a sledovanie dynamiky choroby:

  • v prvých 2 týždňoch choroby sa nachádzajú iba imunoglobulíny A;
  • od druhého do tretieho týždňa choroby sa v krvi nachádzajú imunoglobulíny A a M;
  • CC3 počas 4 týždňov je krvný test na imunoglobulín určený všetkými tromi typmi;
  • počas zotavovania imunoglobulíny M v krvi vymiznú a množstvo A a G klesne 2 až 4 krát;
  • v prítomnosti chronického procesu sú imunoglobulíny G nevyhnutne prítomné v krvi, imunoglobulíny M chýbajú, imunoglobulíny A môžu byť prítomné alebo chýbajú.

Rozsah imunologického krvného testu pomocou ELISA

  • Diagnostika vírusových chorôb: hepatitída, opar, vírus Epstein-Barrovej, cytomegalovírus atď.
  • sexuálne prenosné infekcie: chlamydia, kvapavka, Trichomonas, mykoplazma, ureaplazma;
  • syfilis; endokrinológia (stanovenie hladín hormónov);
  • nádorové markery (diagnostika onkologických ochorení); imunológia (diagnostika imunodeficiencie);
  • alergológia (diagnostika a liečba alergií).

Sérologický krvný test je laboratórna metóda krvného testu, ktorá sa používa na diagnostikovanie infekčných chorôb a určovanie štádia infekčného procesu. Sérologická odpoveď je založená na interakcii protilátok a antigénov.

Stanovenie antigénov sa používa na stanovenie rodu a druhov mikroorganizmov. Táto výskumná metóda sa používa v urológii a venereológii. Krv na sérologické vyšetrenie krvi sa odoberá ráno na lačný žalúdok z žily.

Indikácie menovania a zistených chorôb metódou ELISA

Hlavným biomateriálom pre test ELISA je krvné sérum: v laboratóriu sa pacientovi odoberie vzorka krvi zo žily, z ktorej sa ďalej odstránia tvarované prvky, ktoré komplikujú analýzu. V niektorých ďalších prípadoch sa na analýzu používa mozgomiešna tekutina, plodová voda, stery slizníc atď.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Aby sa predišlo narušeniu výsledkov, odporúča sa darovať krv na lačný žalúdok a dva týždne pred štúdiou (ak je cieľom diagnostikovať chronické, latentné infekčné choroby) je potrebné prestať užívať antibiotiká a antivírusové lieky. Úplný zoznam indikácií pre ELISA nie je možné pokryť.

Najbežnejšie ciele analýzy sú:

  • diagnostika akútnych a chronických infekčných chorôb: IgM a IgG proti vírusovým vírusom hepatitídy A, B, C, E, ako aj antigénom hepatitídy B a C; IgG proti HIV; Ig M a IgG na cytomegalovírusovú infekciu; Ig M a IgG proti vírusu Epstein-Barrovej; Ig M a IgG proti herpetickým infekciám; Ig M a IgG proti toxoplazmóze;
  • Ig M a IgG proti osýpkam, rubeole, salmonelóze, úplavici, kliešťovej encefalitíde a iným chorobám; IgG proti parazitárnym chorobám; Ig M a IgG na sexuálne prenosné infekcie; Infekcia IgG na Helicobacter pylori. Všeobecné hodnotenie ukazovateľov ľudskej imunity a markerov niektorých autoimunitných chorôb. Identifikácia onkologických markerov (tumor nekrotizujúci faktor, antigén špecifický pre prostatu, embryonálny antigén rakoviny a iné). Stanovenie obsahu hormónov v krvnom sére (progesterón, prolaktín, testosterón, hormón stimulujúci štítnu žľazu a ďalšie).

Výhody metódy ELISA

Nespornými výhodami testu ELISA sú vysoká citlivosť a špecifickosť metódy. Citlivosť je schopnosť rozpoznať cieľovú látku, aj keď je jej koncentrácia vo vzorke nízka. Špecifickosť na druhej strane znamená presnosť diagnózy: ak je výsledok pozitívny, znamená to, že presne bola nájdená protilátka alebo antigén, ktorý sa predpokladal, a nie iné.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

ELISA do značnej miery nahradila „zlatý štandard“mikrobiológie - bakteriologickú diagnostickú metódu, počas ktorej bolo potrebné na identifikáciu patogénu izolovať ho od tela a potom kultivovať kultúru na živnom médiu v skúmavke niekoľko dní.

Po celú dobu vykonávania analýzy boli lekári nútení liečiť pacienta „slepo“, hádajúc o pôvode mikroorganizmu podľa príznakov choroby. Stanovenie IgM pomocou ELISA vám umožňuje urobiť presnú diagnózu v prvých dňoch ochorenia.

Vysoký stupeň spracovateľnosti enzýmového imunotestu minimalizuje vplyv ľudského faktora, čo znižuje pravdepodobnosť chyby. Väčšina testovacích súprav a činidiel ELISA používaných v moderných laboratóriách sa vyrába v priemyselnom prostredí, čo zaručuje presný výsledok.

Nevýhody metódy ELISA

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Bohužiaľ, na vykonanie testu ELISA musíte vedieť, čo presne treba hľadať: analytická technika znamená, že lekár má vopred predpoklad o povahe choroby. Preto nemá zmysel predpisovať takýto test v nádeji, že náhodne "uhádne" diagnózu.

V prípade diagnózy infekčných chorôb nemôže enzýmový imunotest nájsť patogén a určiť jeho špecifické vlastnosti: iba indikuje prítomnosť protilátok v krvi pacienta a nepriamo naznačuje prítomnosť cudzieho mikroorganizmu v ľudskom tele. ELISA je veľmi presná, ale nie lacná metóda, preto ju musíte používať rozumne a výsledky by mal interpretovať kvalifikovaný lekár.

Možné výsledky testu ELISA

V závislosti od obsahu analýzy môže forma obsahovať údaje vo forme tabuľky, v ktorej sú uvedené všetky protilátky alebo antigény s poznámkami o negatívnej alebo pozitívnej reakcii, alebo bude uvedená kvantitatívna hodnota výsledku (negatívna, slabo pozitívna, pozitívna alebo ostro pozitívna).

Druhá možnosť určuje, koľko protilátok je obsiahnutých v analyzovanej vzorke. Ďalším kvantitatívnym ukazovateľom je index avidity protilátok vyjadrený v percentách. Označuje, koľko času uplynulo od začiatku infekčného procesu (čím vyšší je index, tým viac).

Dnes sa vyrábajú tisíce typov testovacích systémov ELISA, ktoré umožňujú detekciu špecifických protilátok a antigénov v rôznych patológiách. Preto sa táto analýza používa takmer vo všetkých lekárskych odvetviach. Diagnóza stanovená pomocou ELISA je zárukou vymenovania adekvátnej liečby a účinnej liečby choroby.

Oddelenie krvného testu ELISA
Oddelenie krvného testu ELISA

Ak máte potrebné činidlá a dobrú organizáciu laboratória, výsledok testu dostanete do 1-2 dní po odbere krvi. V niektorých prípadoch, ak sa vyžaduje reakcia na núdzové situácie, sa táto lehota môže skrátiť na 2 - 3 hodiny.

Výsledkom vysokokvalitného testu ELISA bude jednoznačný verdikt: požadovaná látka sa vo vzorke buď nájde alebo sa nenachádza. Ak hovoríme o kvantitatívnej analýze, potom je možné koncentráciu vyjadriť ako číselnú hodnotu alebo určitý počet znamienok „+“(od jedného do niekoľkých).

Zistiť viac:

  • Protilátkový krvný test: diagnostika imunitného systému
  • Imunoanalýza krvným testom v parazitológii

Odporúčaná: