Analýza Pre Lambiu - Ako Ju Správne Odovzdať, Dekódovať

Obsah:

Analýza Pre Lambiu - Ako Ju Správne Odovzdať, Dekódovať
Analýza Pre Lambiu - Ako Ju Správne Odovzdať, Dekódovať

Video: Analýza Pre Lambiu - Ako Ju Správne Odovzdať, Dekódovať

Video: Analýza Pre Lambiu - Ako Ju Správne Odovzdať, Dekódovať
Video: The War on Drugs Is a Failure 2024, Marec
Anonim

Giardiáza je parazitárna infekcia spôsobená najjednoduchším mikroorganizmom Lamblia intestinalis (Giardia Lamblia). Ochorenie prebieha v latentnej asymptomatickej forme aj vo forme jasne vyjadrených klinických príznakov, zvyčajne vo forme syndrómu dyspeptického čreva. Ďalej budeme hovoriť o tom, ako sa otestovať na Giardii.

Image
Image

obsah

  1. Čo je to lamblia
  2. Ako je diagnostikovaná giardiáza?
  3. Analýza výkalov lamblie
  4. Krvný test na protilátky
  5. Imunoanalýza krvným testom
  6. Ako sa pripraviť na analýzu
  7. Ako dešifrovať výsledky testu ELISA
  8. Metóda polymerázovej reťazovej reakcie (PCR)
  9. Príprava na test PCR
  10. Dekódovanie výsledkov
  11. Vyšetrenie duodenálnej tekutiny

Čo je to lamblia

Pôvodca ochorenia je dobre známy a študovaný. V ľudskom tele existujú lamblie v dvoch formách:

  • vegetatívny (trofozoity);
  • cystická.

Tropozoity (vegetatívne formy lamblia) parazitujú v tenkom čreve, ale pri migrácii do hrubého čreva sa premieňajú na cysty (spóry), ktoré sa spolu s výkaly uvoľňujú do vonkajšieho prostredia. Giardia vo forme cýst si môže dlho udržať svoju vitalitu v očakávaní priaznivých podmienok. Akonáhle sa v ľudskom čreve, cysty menia na trofozoity, pripájajú sa k črevnej sliznici a týmto spôsobom sa živia. Životný cyklus trofozoitov je 40 dní, ale samotné ochorenie môže trvať veľmi dlho a niekedy môže mať chronickú podobu, pretože sa neustále objavuje reinfekcia (samoinfekcia) lamblia. V dôsledku neustálej existencie týchto prvokov v tele sa vyvíja syndróm chronickej endogénnej intoxikácie. V kombinácii so znížením funkcií imunitného systému to môže viesť k narušeniu fungovania všetkých orgánov a systémov tela.

Image
Image

K infekcii dochádza fekálno - orálnou cestou iba u osoby infikovanej lambliou. Giardia, parazit u hlodavcov, nie je pre človeka nebezpečný.

Ako je diagnostikovaná giardiáza?

Klinický polyformizmus symptómov giardiázy, ako aj jej asymptomatický priebeh, si v niektorých prípadoch vyžadujú povinné laboratórne potvrdenie diagnózy. Výskumný materiál je:

  • výkaly;
  • krvi;
  • duodenálna tekutina.

Testy na Giardia zahŕňajú:

  • fekálne vyšetrenie;
  • krvný test;
  • štúdium duodenálnej tekutiny.

V duodenálnej šťave sa vyskytujú iba trofozoity, vo výkaloch sa nachádzajú iba cysty, v trofónoch sa nachádzajú trofozoity a cysty. Protilátky lamblie sa nachádzajú v krvi, čo spoľahlivo naznačuje ich prítomnosť v tele.

Image
Image

Najjednoduchšou a najdostupnejšou výskumnou metódou na diagnostikovanie giardiázy je scatologické vyšetrenie stolice alebo koprogramu.

Analýza výkalov lamblie

Analýza výkalov lamblie je klasická metóda výskumu. Podstatou metódy je skúmať teplé čerstvé výkaly pod mikroskopom. Toto je predpoklad na odhalenie živej Giardie, pretože sa nachádza iba v takýchto výkaloch. Pri vykonávaní štúdie by sa malo pamätať na to, že cysty vo výkaloch sa vždy nedajú nájsť. To však vôbec neznamená, že tam nie sú. Iba vylučovanie cýst vo výkaloch má nestály charakter. Niekedy vyniknú a niekedy je tento proces pozastavený. Preto je potrebné vykonať opakované scatologické vyšetrenie trusu alebo túto analýzu doplniť o ďalšie výskumné metódy. Ak sa v stolici našli cysty lamblie, potom je test pozitívny. Pozitívny test stolice nie je nikdy nesprávny, ale negatívny výsledok je veľmi často nesprávny.

Image
Image

Analýza výkalov pre lambliu sa považuje za úplne informačnú metódu výskumu, ale iba so správnym zberom biologického materiálu (výkaly). Hlavným problémom pri darovaní výkalov spoločnosti Giardia je to, že biomateriál (výkaly) sa musí zbierať okamžite po pohybe čriev. Malo by byť čerstvé a stále teplé. Inými slovami, od zberu trusu do jeho vyšetrenia by malo trvať 20 minút, ale nie neskôr ako dve hodiny. Vzorka večernej stolice sa môže chladiť, ale obsah informácií v stolici je znížený. Uprednostňuje sa dvojhodinová vzorka stolice, pretože obsahuje parazity v ich živej aktívnej forme.

Iba v takomto materiáli je možné nájsť lambliu vo vegetatívnej forme, to znamená, že sú v prirodzenom stave: pohyblivá, s bičíkom. Pre laboratórneho asistenta nebude ťažké nájsť ich v tejto podobe. Avšak po určitej dobe títo paraziti „prvokov“„chápu“, že s ich pohodlnou existenciou v črevách nastali určité zmeny. Teplota stolice, jej kyslosť a vlhkosť, na ktorú paraziti reagujú, sa zjavne menia. To im spôsobuje prechod do cysty, v ktorej sú schopní prežiť nepriaznivé podmienky prostredia. Živá lamblia sa prestane pohybovať, stráca bičíky, zakryje sa ochrannou membránou, prezimuje a zachová sa. V tomto stave môžu byť dosť dlho. Ale aj v tomto stave sú dobre pozorované pod mikroskopom, pretože nikde nezmiznú. Preto je stolica uložená v chladničke vhodná aj na výskum. Je to len o tom, že jej informačný obsah klesá, ale nezmizne úplne.

Pred vykonaním testu stolice by ste mali prestať užívať lieky protiprotozoálne, sorbenty, preháňadlá na týždeň a tiež by nemali robiť klystír. Výkaly sa odoberajú ráno ihneď po vyprázdnení z rôznych miest: zhora, zdola a zvnútra. Zhromaždený materiál sa uloží do jednorázovej lyžice do čistej a priestrannej nádoby.

Image
Image

Dlhodobé skladovanie stolice až do 2 dní je povolené za predpokladu, že vzorka je umiestnená do špeciálnej konzervačnej kvapaliny Turdyev. Pravdepodobnosť detekcie parazitov sa zvyšuje, ak sa stolica zriedi konzervačným prostriedkom v pomere 1 až 3. To umožňuje, aby sa parazity udržali v prirodzenej živej forme až jeden mesiac. Konzervačný roztok navyše umožňuje identifikovať lambliu bez narušenia ich štruktúry, a to aj s minimálnym obsahom výkalov.

Krvný test na protilátky

Na zistenie týchto mikroskopických organizmov v nich sa nevykonáva krvný test na lambliu. Giardia nie je a nemôže byť v krvi. Ich biotop je gastrointestinálny trakt: tenké črevo, hrubé črevo alebo žlčové cesty pečene. Dôkazom prítomnosti lamblie v tele sú špeciálne protilátky v krvi, ktoré sú produkované imunitným systémom po prijatí signálu o výskyte cudzích látok v tele. Napriek tomu, že analýza výkalov sa stále používa v medicíne a je niekedy dosť informatívna, v súčasnosti sa na identifikáciu tohto najjednoduchšieho parazita stále viac používajú imunologické výskumné metódy.

Dnes sú to najspoľahlivejšie spôsoby identifikácie tých najjednoduchších. Po dobu 10 dní sa kvapka krvi podrobí enzýmovému imunotestu, počas ktorého sa stanovia negatívne vzorky na výpočet diagnostickej hustoty.

Image
Image

Až pred niekoľkými rokmi bola diagnostika giardiázy náročnou úlohou, oveľa ťažšou ako jej liečbou. Ale vďaka rozvoju biochémie sa diagnostika giardiázy stala oveľa ľahšou.

Imunoanalýza krvným testom

Test ELISA je založený na imunodiagnostickej metóde antigén - protilátka. Je dobre známe, že náš imunitný systém reaguje na cudzie látky v tele (vírusy, mikróby, parazity, patogénne huby). V dôsledku tejto reakcie sa tvoria protilátky, ktoré by mali neutralizovať „votrelcov“. Výsledkom je vytvorenie komplexu antigén-protilátka. Po detekcii špecifických protilátok v krvi pomocou tohto testovacieho systému (bielkoviny, ktoré sú vylučované imunitným systémom na výskyt parazitových antigénov v tele), je možné s istotou diagnostikovať prítomnosť lamblie, a to aj v neprítomnosti symptómov. Ak sa zistí choroba, test zistí imunoglobulíny a protilátky typu IgM v krvi.

Na detekciu protilátok sa používa krvné sérum, v ktorom sú detegované špecifické protilátky triedy IgM (10-14 dní od začiatku invázie) a potom protilátky triedy IgA a IgG. Dva týždne po infekcii sa v krvi pacienta nachádzajú protilátky triedy IgM, po ktorých sa objavia ďalšie triedy IgG a IgA, ktoré zostávajú na vysokej úrovni v tele vo všetkých štádiách giardiázy a dokonca aj po jej úplnom vyliečení. Protilátky úplne vymiznú z krvi až po 2–6 mesiacoch. Z tohto dôvodu nie je vždy možné s istotou rozhodnúť o úplnom zotavení pacienta, pretože prítomnosť protilátok v tele zostáva dlho.

Image
Image

Výhodou tohto testu je, že takáto analýza giardie vám umožňuje určiť akútnu alebo chronickú formu infekcie alebo jej zvyškové účinky, čo naznačuje, že infekcia bola zničená imunitným systémom. Tento test ELISA sa môže tiež použiť na štúdium výkalov, v ktorých sú prítomné špecifické antigény parazitov GSA 65.

Ako sa pripraviť na analýzu

Analýza protilátok proti antigénom lamblia je predpísaná iba ošetrujúcim lekárom. Okrem toho by sa v smere mala uviesť aj skupina imunoglobulínov (protilátok), pre ktoré sa analýza vykonáva. Krv sa musí odobrať ráno na lačný žalúdok, všetky potrebné opatrenia sa musia urobiť najskôr: 12 hodín pred testom, vylúčiť použitie čaju a kávy, alkoholu alebo džúsu, môžete piť iba čistú vodu. Vzorka krvi sa odoberie z žily a výsledok bude pripravený asi za tri dni.

Ako dešifrovať výsledky testu ELISA

Je potrebné poznamenať, že výsledok získaného krvného testu je dešifrovaný výlučne odborníkom. Pretože pri takejto analýze je naznačených niekoľko typov protilátok, ktoré sú zodpovedné za štádium vývoja ochorenia.

Pozitívnym výsledkom je nasledujúce označenie> 1 OPD, ktoré naznačuje, že telo má protozoálnu inváziu do čreva alebo že infekcia existovala v minulosti.

Čísla menšie ako 0,85 ODD naznačujú negatívny výsledok, takže je veľmi pravdepodobné, že v tele nie sú žiadne parazity.

Indikátory medzi intervalom od 0,85 do 1 ODD naznačujú reanalýzu, pretože vzorec infekcie nie je jasný. V tomto prípade sa vyžadujú ďalšie štúdie o lamblii: analýza stolice a štúdia dvanástnikovej šťavy.

Metóda polymerázovej reťazovej reakcie (PCR)

Podstata metódy je založená na molekulárnej biológii. Na uskutočnenie štúdie sa opakovane skopírujú fragmenty RNA a DNA zambia, ktoré sú v skúmanom biologickom materiáli (krvi). Potom odborníci porovnajú fragmenty a identifikujú typ patogénu a jeho množstvo v tele.

PCR - test sa vykonáva v zosilňovači - špeciálnom zariadení, ktoré ochladzuje a súčasne ohrieva skúmavky biomateriálom. Tieto manipulácie sú potrebné na uskutočnenie replikácie DNA a RNA. Presnosť odčítania teploty ovplyvňuje spoľahlivosť výsledku.

Image
Image

Táto metóda je veľmi informatívna. Umožňuje detekovať parazity aj v prípade, že vo vzorke je iba jedna molekula DNA. Práve táto skutočnosť urobila z testu PCR jednu z najúčinnejších diagnostických metód.

Príprava na test PCR

Príprava na test závisí od toho, aký biologický materiál sa bude skúmať. Ak sa zistí lamblia, použije sa krv. Krv sa daruje ráno na lačný žalúdok v laboratórnych podmienkach v sterilnej skúmavke.

Dekódovanie výsledkov

Výsledok analýzy PCR môže byť pozitívny alebo negatívny. Ak je výsledok negatívny, znamená to, že Giardia nie je prítomná v tele a že je človek zdravý. Pozitívny výsledok naznačuje prítomnosť segmentov cudzej DNA v ľudskej krvi a hovorí o jeho infekcii.

Táto štúdia môže dať pozitívny výsledok v najskoršom štádiu choroby, keď pacient nepociťuje žiadne príznaky choroby. Mnoho pacientov má sklon nesprávne interpretovať výsledky štúdie. Neexistuje však žiadna chyba. Je to len tak, že samotná giardiáza môže byť asymptomatická, alebo je choroba v prvom štádiu choroby. Ako liečiť giardiázu a či ju vôbec liečiť, určuje iba kompetentný odborník. Terapeutické opatrenia sa zvyčajne uplatňujú iba vtedy, keď je choroba symptomatická.

Vyšetrenie duodenálnej tekutiny

Pretože lamblia parazituje nielen v tenkom čreve, ale aj v dvanástniku, duodenálna šťava môže byť pre výskum pomerne informačným materiálom. Ak analýza fekálnej lamblie vzbudí určité pochybnosti, potom štúdia okamžitého obsahu dvanástnika môže odhaliť tieto protozoálne parazity.

Image
Image

Na tento účel sa urobí fibrogastroskopia. Aby zákrok prešiel s maximálnym pohodlím, musíte sa naň starostlivo pripraviť:

  • tri dni pred údajnou štúdiou je potrebné opustiť korenené, vyprážané a korenené jedlá, ktorým by sa malo vyhnúť jedlám, ktoré prispievajú k nadmernej tvorbe plynu;
  • jesť ľahké jedlo deň pred zákrokom;
  • počas 8 hodín a výskumu nemôžete nič jesť ani piť;
  • tri dni pred zákrokom by ste sa mali vyhnúť fajčeniu a alkoholu, pretože fajčenie môže stimulovať sekréciu žalúdočnej šťavy, čo môže viesť k už aj tak nepríjemnému postupu;
  • ak pacient užíva určité lieky každý deň, potom sa liečba nemôže prerušiť, ale okrem toho by ste sa mali poradiť s ošetrujúcim lekárom;
  • postup netrvá dlhšie ako 20 minút.

Štúdium duodenálnej tekutiny odhalí lokalizáciu lamblie v tele, čo zjednoduší liečbu giardiázy.

Odporúčaná: